Tehnik pemeriksaan preparat tekan (tempel jaringan) pada ikan

Tujuan

Pemeriksaan organ dengan metode ini umum digunakan untuk diagnosa penyakit ikan (bakteri, virus, parasit). Preparat tekan juga dapat digunakan untuk pengamatan sitologi sederhana dan cepat. 

Alat dan bahan

• 1 set alat bedah
• Pewarna (HE, giemsa, wright giemsa, dll) 
• metanol, alkohol 70%
• Objek glass
• Cover glass
• Bunsen
• Mikroskop

Prosedur 

Pembuatan preparat tekan

• Siapkan ikan, lakukan prosedur nekropsi abdomen
• Sayat organ tipis dengan pisau bedah, letakkan pada objek glass. Organ yang umum digunakan untuk pengamatan adalah hati, limpa, ginjal.
• Lakukan penempelan organ pada objek glass dengan cara:
  
  1. ditempel (squash); Buat irisan pada organ, tempatkan sisi dalam potongan pada objek glass, tekan Dan ulaskan dengan menjepit organ menggunakan pinset hingga terbentuk lapisan tipis. Tambahkan aquades/NaCl jika ingin langsung diamati. Atau dapat juga dikeringanginkan untuk selanjutnya diwarnai. 
  
  2. ditekan dengan objek glass lain (imprint): iris organ dengan ukuran sekitar 1cm3, letakkan organ pada objek glass, tekan pada objek glass
  
  3.diulaskan (smear); kerok organ menggunakan pisau bedah, ulaskan pada objek glass
  
  
• Kering anginkan
• Fiksasi dapat menggunakan Bunsen 2-3 Kali lalu rendam dengan alkohol 70% selama 5 menit atau langsung menggunakan methanol 
• Keringanginkan

Staining/ pewarnaan

• Bila menggunakan giemsa 10% (9 bagian aquades: 1 bagian giemsa stock) diamkan selama 30 menit, bilas dengan air mengalir, kering anginkan
• Amati dengan mikroskop
• Pada dugaan kasus infeksi bakteri, pewarnaan gram dapat dilakukan
• Pada dugaan kasus Mycobacterium, pewarnaan tahan asam dapat dilakukan

Gb 1. Imprint; 2. Smear 3. Squash

Parameter

• Bakteri
• Parasit (sporozoa)
• Virus (enlarged cell)
• Jamur
• Sitologi (abnormalitas sel, hematopoiesis)

Referensi

Ashley, L.M. Dan C.E. Smith. 1963. Advantages of tissue imprints over tissue sections in studiess of blood cell formation. The Progressive Fish Culturist 25(1)

Singh, B. 1989. Final Report Training Course on Tropical Fish Health. Central Inland Capture Fisheries Research Institute: India

Tusihadi, T., Kurniastuty, Dewi, J. 2007. Preparasi dan Pengelolaan Sampel dalam Pemeriksaan Penyakit dalam Balai Besar Pengembangan Budidaya Laut Lampung. 2007. Petunjuk Teknis Pengambilan Sampel. Seri Budidaya Laut no 15

Wildgoose, W.H (Ed). 2001. BSAVA Manual of Ornamental Fish. British Small Animal Veterinary Association